人肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)ELISA试剂盒

ELISA小常识：ELISA试验条件固相载体的选择：载体的种类比较多，其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是应用最广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作简便、用量小，适于大批检查。由于聚苯乙烯的工艺过程不是很稳定,造成各批次差异比较大。所以进行ELISA之前，必须进行筛选。检查方法：⑴ 吸附性能的检查：先加抗体包被，然后加入同一稀释度的酶标抗体，最后加底物、显色、测OD值,求出总平均OD值,再求出每相邻两孔的OD平均值,此均值在总均值的±10%以内为合格,若中间孔与四周孔OD值相差太大，或一侧与另一侧孔OD值相差较大均属不合格。⑵ 对比测定阳性血清与阴性血清，观察是否存在明显差异，若二者OD值相差于10倍以上者为合格。板的处理。新板一般不用处理,用蒸馏水冲洗即可应用。板用一次即废。但不少实验工作者认为用超声波处理，清洁液Tritonx100、20%乙二醇处理仍可应用。但发现空白对照显色较深和阳性样品显色结果不理想时，应放弃不用。

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ELISA试剂盒的清洗操作注意事项

(1)试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

(4)使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

(6)洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

(7)底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

(8)加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

(9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。