体细胞治疗中患者自体血浆的制备-分析方法-资讯-生物在线

体细胞治疗中患者自体血浆的制备

作者:百恩维生物科技有限公司 2014-12-03T00:00 (访问量:3766)

 为了减少患者自体细胞培养过程中未知微生物的交叉感染,国家药监局在《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》中已明确指明禁用同种异体血浆。从这个意义上来说在我国进行的CIK等细胞治疗中是应避免使用AB血浆的。患者自体血浆的合理应用不仅可以降低细胞的培养成本,也可以取得更佳的培养效果。

 

操作:

1. 注采50 ml 外周血,置于250 ml的离心管 (AB) 中,分别加入6HES (羟乙基淀粉) 5 ml
        2. 混匀后室温静置30分钟,红细胞和HES结合沉降于离心管底部。
        3. AB管上部含有白细胞的血浆移至新的离心管 (C)
        4. AB管离心 (400g,10min) ,取红细胞上部的少量血浆也加入C管 。
        5. 离心C(400g,10min),上清液移至新离心管 (D)C管下部的细胞作Ficoll分离PBMC用。
       6. D管放入56 水浴30分钟,灭活补体。
      7. 离心 (800g,20min) 除去D管中絮状沉淀物,将上清移至新离心管 (E)
       8. E管中的上清 (25 ml) 作为患者的自体血浆可在细胞培养中添加使用。

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