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作者:MedChemExpress LLC 暂无发布时间 (访问量:331)

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蛋白 L 磁珠

MCE 国际站:Protein L Magnetic Beads

品牌:MedChemExpress (MCE)

货号:HY-K0205

产品活性:蛋白 L 磁珠使用纳米表面生物技术将 Protein L 包被在超顺磁性磁珠微球表面。磁珠表面抗体结合位点多,非特异性结合低,使用简便有效。

操作流程:1. 抗原样品制备根据不同的样品选择合适的处理方法2. 磁珠预处理2.1 充分重悬磁珠.2.2 取 25-50 μL 蛋白质 L 磁珠转移到 1.5 mL EP 管中(用量量可根据需要调整)。2.3 加入 400 μL 结合/洗涤缓冲液,充分重悬磁珠。将 EP 管放入磁力架上,磁性分离。弃上清液。重复此步骤 2 次。3. 抗体与磁珠结合3.1 使用结合/洗涤缓冲液将抗体稀释至终浓度为 5-50 μg/mL 。3.2 将稀释好的 400 μL 抗体加入步骤 2 处理好的磁珠中,充分混悬,置于翻转混合仪孵育 (室温,30 mins;4°C,2 hours)。3.3 磁性分离,收集磁珠,上清液收集于新的 EP 管中,以备后续使用。3.4 加入 400 μL 结合/洗涤缓冲液,充分混悬磁珠,磁性分离,弃上清;重复洗涤 4 次。4. 抗原与抗体-磁珠复合物结合4.1 加入 400 μL 抗原样品准备的抗原样品,充分混悬,置于翻转混合仪孵育 (室温,30 mins;4°C,2 hours) ,磁性分离,弃上清。4.2 加入 400 μL 结合/洗涤缓冲液 充分重悬磁珠,磁性分离,弃上清;重复洗涤 4 次。5. 抗原洗脱本说明书提供以下两种抗原洗脱方案,操作者可根据后期检测的需要选择不同的抗原洗脱方法。a. 变性洗脱法:此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 25-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀,95°C 加热 5 mins。分离磁珠,收集上清,进行 SDS-PAGE检测。b. 非变性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析。步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 25-50 μL 洗脱缓冲液,室温孵育 10 mins;分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,并立即滴入总体积 1/10 体积的中和缓冲液 (0.1 M NaOH),将洗脱产物 pH 调节至中性,样品用于后期功能分析。注: 本步骤洗脱的抗原为抗原-抗体复合物,如操作者需要单独洗脱目标抗原,推荐使用交联剂,并按相关实验说明操作。

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品牌介绍:
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•   提供虚拟筛选,离子通道筛选,代谢组学分析检测分析,药物筛选等专业技术服务;
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