当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后，主要抑制mRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论哪一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，莱德尔的技术人员利用Promega特有psiCHECK载体，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。
服务优势：
1.采用Promega公司特有psiCHECK质粒；
2.所采用的Luciferase双荧光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；
3.采用瞬时转染技术，操作简便、快速、周期短，适用于绝大多数细胞类型。
服务流程：
1、PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；
2、将上述DN**段克隆至报告载体psiCHECK质粒；
3、合成miRNA模拟物；
4、将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；
5、多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。
microRNA靶基因鉴定：luciferase报告基因表达载体的构建与检测
作者：广州莱德尔生物科技有限公司 2013-09-26T16:13 (访问量:3238)
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