细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。
去污剂主要类型及其作用
根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。
去污剂主要类型及其作用
| 类型 | 带电情况 | 作用 | 应用 | 举例 |
|---|---|---|---|---|
| 离子型 (变性去污剂) | 带电荷的 阴离子性或阳离子性的 | 破坏蛋白活性、功能及蛋白间相互作用力 | 总蛋白提取 SDS-PAGE | SDS ETMAB |
| 非离子型 (非变性去污剂) | 不带电荷 | 较少破坏活性及功能，可维持蛋白间作用力 | 酶学检测 免疫检测 | Triton X-100 Tween 20 NP-40 |
| 两性离子型 | 具有正电荷和负电荷的基团 但净电荷为零 | 兼具离子型和非离子型去污剂的特点，能破坏蛋白质间相互作用 | CHAPS CHAPSO |
根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类
| 蛋白定位 | 全细胞 | 细胞质 （可溶性蛋白） | 细胞质 （细胞骨架等不溶性蛋白） | 细胞膜 | 细胞核 | 线粒体 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 裂解液种类 | NP-40或RIPA | Tris-HCl | Tris-Triton | NP-40或RIPA | RIPA | RIPA |
常用细胞裂解液
#RIPA缓冲液
最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名，是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。
常用配方：
25 mM Tris-HCl, pH 7.6
150 mM NaCl
1% NP-40
1%去氧胆酸钠
0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。
#IP缓冲液
是一种修饰型的RIPA缓冲液（不含SDS），可有效溶解细胞蛋白，但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物，可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。
常用配方：
25 mM Tris-HCl, pH 7.4
150 mM NaCl
1% NP-40
1% mM EDTA
5% 甘油
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。
#NP-40缓冲液
NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂，常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。
常用配方：
150mM NaCl
1.0% NP-40
50mM Tris-HCl，pH值8.0
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。
#Tris-Triton缓冲液
非离子型表面活性剂，常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。
常用配方：
10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4
100mM NaCl
1mM EDTA
1mM EGTA
1% Triton X-100
10% 甘油
0.1% SDS
0.5% 去氧胆酸钠
兼容应用：
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。
产品列表
| 产品号 | 产品名称 | 规格 | Cas | 包装 |
|---|---|---|---|---|
| C111538 | 氯化钠 | 用于细胞和昆虫细胞培养,≥99.5%(T) | 7647-14-5 | 500g,2.5kg |
| N105507 | NP-40 | ~10% in H2O | 9016-45-9 | 25ml,100ml, 500ml,5L |
| T109026 | Triton X-100 | 生化试剂级 | 9002-93-1 | 100ml,500ml,1L,4L |
| T105291 | 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(Tris HCl) | 用于分子生物学和细胞培养,≥99.0%(AT) | 1185-53-1 | 100g,500g |
| S104198 | 脱氧胆酸钠 | 98% | 302-95-4 | 25g,100g, 250g,500g |
| S118591 | 十二烷基硫酸钠(SDS) | 分子生物学级,≥98.5% (GC) | 151-21-3 | 25g,100g, 500g |
| T110602 | 三(羟甲基)氨基甲烷(Tris） | 细胞培养级,≥99.9%(T) | 77-86-1 | 5kg |
| E112489 | 乙二胺四乙酸(EDTA) | 99%,用于细胞培养 | 60-00-4 | 100g,500g |
| E104434 | 3,6-二氧杂-1,8-辛二胺四乙酸（EGTA） | 用于分子生物学,≥99.0% | 67-42-5 | 25g,100g, 500g |
| G118851 | 甘油 | 无菌,for molecular biology, ≥99% | 56-81-5 | 100ml |