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北京索莱宝科技有限公司 张净花 010-56371206 13426459985
货号:E1171
规格:100ml/500ml
保存:常温保存,有效期1 年。
产品简介:
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不
同,较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如
脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)
以及电解法脱钙。
EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类, 经EDTA
脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
Solarbio EDTA 脱钙液优点:①经EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③用化学方法
测试可以确定脱钙的终点。
Solarbio EDTA 脱钙液缺点:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬。
操作步骤:
1,骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。
2,组织固定后,用PBS 清洗3 次,每次20min。
3,组织用蒸馏水洗清洗3 次,每次20min。
4,组织转移至20~30 倍体积的EDTA 脱钙液中,脱钙10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可
以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2 周~3 个月即可,每周更
换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度
和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。
5,用蒸馏水冲洗数次。
6,常规脱水、包埋。
注意事项:
1,厚度5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30 天即可。
2,适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不
可大于60℃。
3,脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免
脱钙过长引起组织损害。
4,脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5,骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6,每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
7,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录:
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止
脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。
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