翌圣ZymeEditor™精品盘点之脱氧核糖核酸酶I(DNase I)
脱氧核糖核酸酶I(Deoxyribonuclease I, DNase I),是一种可以消化单链或双链DNA的非特异性核酸内切酶。它能够水解磷酸二酯键,产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。
DNase I最佳的工作pH范围是7-8,其活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Mn2+,Mg2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在条件下,DNase I 随机剪切双链DNA的任意位点;Mn2+存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
图1. DNase I在Mg2+以及Mn2+存在下可切割dsDNA原理图
翌圣DNase I由ZymeEditor™酶改造平台重组表达而来,无RNase残留,酶切效率高,作用底物类型广,可应用于体外转录去除模板DNA、RNA建库中去除rRNA、RNA提取或反转录前去除gDNA等多个场景。
图2. RNase残留检测 C:对照
分别使用翌圣及进口品牌T*、N*的DNase I进行体外转录中DNA模板去除,结果显示翌圣DNase I的模板DNA去除效率与国际进口品牌相当。
图3. 体外转录中模板DNA去除 C:不加DNase I对照;T*:进口品牌T*;N*:进口品牌N*;M:Marker
分别使用翌圣及进口品牌T*的DNase I进行rRNA去除,将纯化后的RNA进行建库,结果显示翌圣与进口品牌的DNase I在进行rRNA去除后,RNA建库产量相当。
图4. DNase I用于RNA建库 T*:进口品牌T*
为满足不同的应用需求,翌圣可提供牛胰腺提取来源及大肠杆菌重组表达两种来源的DNase I,并可提供GMP级别DNase I,以满足mRNA体外转录等应用。
产品来源 | 产品定位 | 应用 | 产品名称 | 产品货号 |
牛胰腺提取 | 普通 | 主要用于从蛋白制备物中去除DNA | Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas | 10607ES |
10608ES | ||||
重组表达 | RNase Free | 适用于从RNA和蛋白制备物中去除DNA | Recombinant DNase I (RNase-free) | 10325ES |
重组表达 | GMP级, RNase Free |
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