大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)酶联免疫检测-标准-资讯-生物在线

大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)酶联免疫检测

作者:上海联硕生物科技有限公司 2011-12-15T00:00 (访问量:2968)

大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1)酶联免疫检测

试剂盒使用说明书

使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。

    用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中基质细胞衍生因子-1SDF-1)的测定。

工作原理

本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1)水平。向预先包被了大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1)单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1,温育;温育后,加入生物素标记的抗SDF-1抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物AB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠基质细胞衍生因子-1SDF-1)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶标包被板

1×48

1×96

2-8保存

标准品:2400ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

标准品稀释液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

链霉亲和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

生物素标记的抗SDF-1抗体

0.5ml×1

1 ml×1

2-8保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

需要而未提供的试剂和器材

1.    37℃恒温箱。

2.    标准规格酶标仪。

3.    精密移液器及一次性吸头

4.    蒸馏水,

5.    一次性试管

6.    吸水纸

注意事项

1.    2-8取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.    各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3.    严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4.    为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜

5.    不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6.    底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融。

操作程序

1.       标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

1200 ng/L

5号标准品

120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液

600 ng/L

4号标准品

120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液

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